Substrati delle CDK

I complessi ciclina-CDK guidano il ciclo cellulare fosforilando, fase per fase, set specifici di proteine bersaglio. È la ciclina a determinare quali substrati il complesso fosforila e quando: cambiando la ciclina associata, la stessa CDK indirizza la fosforilazione verso un’altra batteria di proteine. Questa nota raccoglie, per ciascun complesso, cosa viene fosforilato e con quale effetto.


Principio generale

  • La fosforilazione su residui Ser/Thr da parte del complesso ciclina-CDK attiva o inattiva il substrato (cambio conformazionale, mascheramento/smascheramento di siti, marcatura per degradazione).
  • La successione delle cicline (D → E → A → B) impone l’ordine degli eventi: ogni complesso prepara le condizioni per il successivo.
  • Il principio chiave è quindi: una CDK, molte cicline, molti programmi di substrati.

Substrati complesso per complesso

ComplessoFaseSubstrati principaliEffetto della fosforilazione
Ciclina D – CDK4/6G1Proteina del Retinoblastoma (Rb, fosforilazione iniziale); avvio del “sequestro” dei CKIAvvia l’inattivazione di Rb in risposta ai mitogeni e prepara l’attivazione di Ciclina E-CDK2.
Ciclina E – CDK2G1/SProteina del Retinoblastoma (Rb, iperfosforilazione); p27; NPAT; nucleofosmina (NPM); Cdc6 / MCM / ORC; CBP/p300, E2FCompleta il superamento del punto di restrizione e innesca la replicazione (vedi dettaglio sotto).
Ciclina A – CDK1/2S → G2Proteine dei complessi di replicazione del DNAAvvia/sostiene la duplicazione genomica e previene la ri-replicazione.
Ciclina B – CDK1M (mitosi)Condensina; lamine nucleari; proteine associate ai microtubuli; proteine del Golgi; separasiInnesco e progressione della mitosi (vedi sotto).

Dettaglio: i complessi G1 (oltre Rb)

(Integrazione da letteratura — non dalla sbobina; vedi Fonti.) Rb è il substrato-chiave, ma i complessi di fase G1 fosforilano anche altri bersagli che spiegano come la cellula impegna concretamente la transizione G1/S:

  • p27 (CKI): una volta fosforilato da Ciclina E-CDK2, p27 viene marcato per la degradazione (via ubiquitina-ligasi SCF/Skp2). Si crea un feedback positivo: meno p27 → più attività CDK → ancora più degradazione di p27. È il “punto di non ritorno” verso la fase S.
  • NPAT: la sua fosforilazione accende la trascrizione dei geni istonici, necessari a impacchettare il DNA che sta per essere replicato.
  • Nucleofosmina (NPM): fosforilata, si stacca dal centrosoma e ne consente la duplicazione (così le due cellule figlie avranno ciascuna il proprio centrosoma).
  • Cdc6, MCM, ORC: componenti dei complessi di pre-replicazione sulle origini; la loro fosforilazione coordina l’avvio (firing) della replicazione del DNA.
  • CBP/p300 ed E2F: la fosforilazione ne potenzia l’attività trascrizionale, amplificando il programma genico della fase S.

Riassumendo, i complessi G1 non si limitano a “spegnere il freno” (Rb): preparano attivamente tutto l’occorrente per replicare — istoni, centrosoma, macchina di replicazione — e demoliscono l’inibitore p27.


Dettaglio: Ciclina B – CDK1 (il complesso mitotico)

È il complesso con il ventaglio di substrati più ampio, perché deve riorganizzare l’intera cellula per la divisione:

  • Condensina → condensazione della cromatina in cromosomi mitotici.
  • Lamine nucleari → disgregazione della lamina e dissoluzione dell’involucro nucleare.
  • Proteine associate ai microtubuli (MAP) → assemblaggio e organizzazione del fuso mitotico.
  • Proteine dell’apparato di Golgi → frammentazione del Golgi in mini-stack.
  • Separasi → promuove la separazione dei cromatidi fratelli all’anafase (taglio delle coesine residue). Dettaglio in Mitosi (anafase).

Perché conta (oncogenesi)

La specificità ordinata dei substrati è ciò che garantisce che le fasi non si sovrappongano. Se i complessi G1 (D/E-CDK) iperfosforilano Rb fuori controllo — per eccesso di cicline o per perdita degli inibitori CKI (p27, p21, p16) — E2F resta libero e la cellula entra in fase S anche senza segnali o con DNA danneggiato, motore della proliferazione tumorale.


Fonti

  • Substrati dei complessi mitotici (Ciclina B-CDK1) e principio generale: sbobine del corso (vedi Cicline e Chinasi Ciclina-Dipendenti).
  • Substrati G1 oltre Rb (p27, NPAT, NPM, Cdc6/MCM/ORC, CBP/p300): letteratura — Identification and Functional Analysis of a Novel Cyclin E/Cdk2 Substrate (PMC2658080); rassegne sui substrati di Ciclina E-CDK2.

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