RT-QuIC

Principio

La RT-QuIC (Real-Time Quaking-Induced Conversion) è un test liquorale specifico per la Malattia di Creutzfeldt-Jakob, introdotto negli ultimi anni. Simula in vitro il meccanismo patologico della malattia:

1. la proteina prionica ricombinante (PrP normale) viene mescolata al liquor del paziente, che contiene la forma patologica;
2. la forma patologica fa da stampo molecolare e induce le proteine sane ad assumere la stessa conformazione anomala, amplificando la reazione in modo simile a una “PCR proteica”;
3. il campione viene agitato meccanicamente (quaking);
4. si rileva la fluorescenza con reagenti come la tioflavina T, che si lega agli aggregati proteici.

Interpretazione

• Positivo: aumento della fluorescenza nel tempo, entro circa 72 ore.
• Soggetti sani: curva piatta.

Confronto con la proteina 14-3-3

In passato si ricercava nel liquor la proteina 14-3-3 con Western blot: era un marcatore aspecifico di danno neuronale acuto, non della proteina prionica. La RT-QuIC è invece specifica e sensibile.

Vantaggi

Metodica altamente efficace e riproducibile, con strumentazione relativamente semplice (costo di poche migliaia di euro, non apparecchiature da laboratorio di ricerca avanzata).

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(Integrazione da: sbobina 15)

Evoluzione della metodica

Il saggio è disponibile da circa 10 anni. Una goccia di liquor patologico aggiunta a una provetta di proteina prionica normale ne induce l’aggregazione, rilevata dal saggio biochimico. Inizialmente si eseguiva sulla mucosa olfattoria (prelevata per grattamento) anziché sul liquor, ma era pericoloso: il medico rischiava di inalare l’aerosol di prioni anche indossando la mascherina (Malattie da Prioni).

🔗 Collegamenti

• Malattia di Creutzfeldt-Jakob — 🔬 test diagnostico
• Puntura Lombare (Rachicentesi) — 🔬 prelievo del liquor
• Demenze Rapidamente Progressive (Diagnosi Differenziale) — 🔬 conferma della forma prionica
• Malattie da Prioni — 🔬 test diagnostico