Cluster — Tecniche Diagnostiche e Biopsia Liquida
Dal prelievo alla diagnosi molecolare. Filo: il tipo di esame (cellule o tessuto) → come si allestisce il preparato istologico → come si leggono gli antigeni (IHC) e i geni (FISH, sequenziamento) → come avere informazioni molecolari senza tessuto (biopsia liquida) → come il vetrino diventa un dato digitale analizzabile.
Gli esami anatomopatologici
- Esame Citologico — cellule disaggregate: citologia esfoliativa e agoaspirato, cinque categorie diagnostiche. → quando serve l’architettura del tessuto
- Esame Istologico — tessuto nella sua configurazione nativa: biopsia e pezzo operatorio. → la versione rapida, durante l’intervento
- Diagnosi Intraoperatoria — sezione congelata: a cosa serve e a cosa non deve servire.
- Autopsia — riscontro diagnostico ed epicrisi, anche medico-legale. → il campione istologico va trasformato in un vetrino
Allestimento del preparato istologico
- Processazione del Campione Istologico — la sequenza: campionamento → fissazione → inclusione → taglio.
- Fissazione — blocco dell’autolisi, formalina.
- Inclusione in Paraffina — disidratazione, diafanizzazione, inclusione.
- Colorazioni Istologiche — ematossilina-eosina, colorazioni speciali, istochimiche e immunoistochimiche. → dalla morfologia alla ricerca di antigeni specifici
Tecniche immunofenotipiche
- Immunoistochimica — reazione antigene-anticorpo; uso diagnostico, predittivo e prognostico.
- Anticorpi Monoclonali e Antisieri Policlonali — affinità e specificità del reagente.
- Citofluorimetria a Flusso — più parametri misurati su singole cellule in sospensione. → dalla proteina al gene
Tecniche molecolari
- FISH — ibridazione in situ fluorescente: amplificazioni e traslocazioni.
- CISH e SISH — ibridazione in situ al microscopio ottico.
- Analisi Mutazionale — sequenziamento, PCR/NGS, falsi negativi.
- EGFR — il modello del biomarcatore predittivo (polmone, T790M, glioblastoma). → se il tessuto non c’è o non si può riprelevare
Biopsia liquida
- Biopsia Liquida — informazione molecolare da un fluido corporeo; i quattro bersagli.
- Cellule Tumorali Circolanti — CTC: significato clinico e difficoltà di identificazione.
- Acidi Nucleici Liberi Circolanti — cf-DNA, cf-RNA e miRNA.
- Esosomi — vescicole secrete e loro isolamento.
- Piastrine Educate dal Tumore — piastrine che captano RNA tumorale. → dai bersagli all’uso clinico
- Applicazioni Cliniche della Biopsia Liquida — dalla diagnosi prenatale al monitoraggio oncologico.
- Tumor Mutational Burden — carico mutazionale e neoantigeni. → il TMB è stato proposto come predittore di risposta a
- Inibitori del Checkpoint Immunitario — PD-1/PD-L1 e CTLA-4, Tumor Proportion Score (TPS).
Patologia digitale
- Patologia Digitale — dal vetrino analogico a quello digitale; benefici.
- Flusso di Lavoro Digitale — fasi: pre-imaging, scansione, visualizzazione, controllo qualità.
- Patologia Computazionale — analisi automatica delle immagini e intelligenza artificiale.
🔗 Cluster correlati
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